Перекрестный метод определения группы крови
Проверочное (повторное) определение группы крови по системе AB0 следует проводить перекрестным методом, поскольку он дает точные результаты, а также выявляет эритроцитарные антитела в сыворотке образца крови. При перекрестном методе определения группы крови https://sangvitest.ru/perekrestnyj-metod-opredeleniya-gruppy-krovi/ применяются цоликлоны анти-A, анти-B и анти-AB (или, вместо них, стандартные сыворотки) и стандартные эритроциты групп 0(I), A(II), B(III). Кроме этого, для проведения анализа необходимо следующее лабораторное оборудование и расходные материалы: шесть стеклянных палочек, пипетка Пастера, луночный или плоский планшет для иммуногематологических исследований, песочные часы (на 3 или на 5 минут), настольная лампа, лабораторный стол. Обязательно наличие и использование средств индивидуальной защиты: очков, медицинских перчаток, масок и халата.
Перед проведением исследования на планшет наносится уникальная маркировка. Она должна содержать информацию (в зашифрованном виде) о пациенте, дате проведения анализа и образце крови, взятом для исследования. Планшет размечается на шесть позиций, в два ряда (по три в каждом ряду). Позициям присваиваются следующие обозначения: анти-A, анти-B, анти-AB (первый ряд); 0, A, B (второй ряд). После отстаивания анализируемого образца в течении 30 минут, сыворотка крови отделяется пипеткой Пастера от эритроцитов. На позиции первого ряда следует нанести по одной большой капле соответствующих цоликлонов (или стандартных сывороток). На позиции второго ряда наносятся стандартные эритроциты (также в соответствии с подписями, по одной маленькой капле). Затем пипеткой Пастера сыворотка исследуемого образца помещается рядом с каплями стандартных эритроцитов, а эритроциты исследуемого образца помещаются рядом с каплями цоликлонов (стандартных сывороток). Стеклянными палочками производится попарное смешивание капель исследуемого образца и диагностикумов, для каждой пары используется новая, чистая палочка. Планшет покачивается в течение трех минут, в это время производится наблюдение за смесями.
Если реакция агглютинации (образования хорошо различимых глобул, сгустков или хлопьев) произошла при смешении сыворотки исследуемой крови со стандартными эритроцитами A и B, а исследуемые эритроциты не дали такой реакции ни с одним цоликлоном (стандартной сывороткой), то образец принадлежит к группе крови 0(I). При наблюдении агглютинации исследуемой сыворотки только со стандартными эритроцитами B, а также при агглютинации исследуемых эритроцитов с цоликлонами анти-A и анти-AB (или соответствующими стандартными сыворотками), образец типируется как A(II). В случае агглютинации исследуемой сыворотки со стандартными эритроцитами A, а эритроцитов с цоликлонами (или сыворотками) анти-B, анти-AB, кровь принадлежит к группе B(III). Когда агглютинация исследуемых эритроцитов происходит со всеми тремя цоликлонами, а агглютинация капель исследуемой сыворотки со всеми стандартными эритроцитами не происходит, исследуемая кровь относится к группе AB(IV). В таком случае дополнительно проводится контрольное исследование с целью исключения неспецифичной гемагглютинации путем смешения исследуемых эритроцитов с физраствором (0,9% хлорид натрия). После смешивания не должно наблюдаться образования сгустков, хлопьев или глобул.